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* 来源: * 作者: * 发表时间: 2021/11/26 2:11:56 * 浏览: 184

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有时,有的实验室希望用酶标仪作微量生化测定,故酶标仪生产厂家对其生产的酶标仪扩展了紫外检测功能,此时需要一个340nm波长滤光片此时,酶标仪的测定波长范围就成为340-750nm或800nm。酶标仪有单波长和双波长检测功能有时使用者不知在什么情况下使用单或双波长检测。所谓的“单波长”就是使用一种对显色具最大吸收的波长即450nm或492nm进行比色测定;而“双波长”则除了用对显色具最大吸收的波长即450nm或492nm进行比色测定外,同时用对特异显色不敏感的波长如630nm进行测定,酶标仪最后打印出来的吸光度则为二者之差。630nm波长下得到的吸光度是非特异的,来自于板子上诸如指纹、灰尘、脏物等所致的吸收。因此,在ELISA比色测定中,最好使用双波长,且不必设空白孔。  二、测定的吸光度范围通常,酶标仪的吸光度测定范围在。0-2.5之间即可以满足ELISA的测定要求。早期的酶标仪可测定的吸光度一般在0-2.5之间,但现在基本上都做了拓宽,可达到3.5以上,并且能保持很好的精密度与线性。如Labsystems公司DragonWellscanMK-2的吸光度测定范围为0-3.5,而MultiskanAscent的吸光度测定范围(Abs)达0-4.0,在0-4.0范围,线性误差不超过±2.0%,在0.3-3.0吸光度范围内,测定精密度CV小于±0.2%;3.0-4.0Abs范围内,测定精密度CV小于士0.2%。因此,对于酶标仪的吸光度范围不必去刻意追求大的吸光度范围,主要要看在一定的吸光度范围内的线性和精密度如何。

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